Эритросомы - получение и поглощение эндотелиоцитами In Vitro

Александр Геннадиевич Филиппов; Алексей Александрович Московцев; Татьяна Александровна Синюкова

doi:10.48612/pfiet/0031-2991.2025.03.12-17

Александр Геннадиевич Филиппов ФГБНУ "Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии", Москва, Россия, 125315, Москва, ул. Балтийская, д. 8,
Алексей Александрович Московцев ФГБНУ Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии, Москва, Россия, 125315, Москва, ул. Балтийская, д. 8 https://orcid.org/0000-0002-5648-824X
Татьяна Александровна Синюкова Бюджетное учреждение высшего образования Ханты-Мансийского автономного округа – Югры «Сургутский государственный университет», 628412, Сургут, Россия, проспект Ленина, 1 https://orcid.org/0000-0001-6079-8841

DOI: https://doi.org/10.48612/pfiet/0031-2991.2025.03.12-17

Ключевые слова: эритросомы, эритроциты, эндотелий, наномедицина

Аннотация

Аннотация

Введение. Многие болезни человека патогенетически связаны с дисфункцией эндотелия, что мотивирует разрабатывать лекарственные препараты воздействующие на эндотелиоциты. Для решения задачи разработки терапии нацеленной на эндотелий предлагается использовать методы наномедицины, а именно создание наноразмерных структур доставляющих лекарственный препарат в эндотелиоциты. Перспективным кандидатом на роль нетоксичного, биосовместимого носителя лекарственных препаратов в эндотелиоциты являются нановезикулы из мембран эритроцитов человека. Цель работы – разработка технологии получения наноразмерных везикул мембран эритроцитов человека загруженных модельным соединением, и изучение поглощения полученных везикул эндотелием на модели In Vitro.

Методика. Методом гипотонического гемолиза получали эритроцитарные тени, загружали мембранонепроницаемым флуорецирующим красителем, восстанавливали изотоничность среды и ультразвуковой гомогенизацией получали эритроцитарные наноразмерные везикулы, которые затем отмывали методом диализа или ультрацентрифугирования. Характеризовали полученные эритросомы методами фотонно-корреляционной спектроскопии и просвечивающей электронной микроскопии с обратным контрастом. Изучали поглощение полученных эритросом клетками линии EA.Hy926 с использованием метода проточной цитофлуориметрии и оценивали цитотоксичность эритросом в МТТ-тесте.

Результаты. Получены и охарактеризованы препараты эритросом - наноразмерных везикул из замкнутых теней эритроцитов. Показано, что эритросомы загруженные мембранонепроницаемыми флуоресцирующими красителями поглощаются клетками линии эндотелиоцитов EA.Hy926, рассматриваемыми как модель эндотелия In Vitro. Транспорт эритросом в эндотелиоциты является энергозависимым, т. к. блокируется при 4ºС. Эритросомы не оказывают цитотоксическое действие.

Заключение. Разработана простая и технологичная методика получения из мембран эритроцитов человека наноразмерных везикул загруженных модельным соединением и поглощаемые клетками эндотелиоцитов, что позволяет рассматривать полученные эритросомы как перспективные средства доставки лекарственных препаратов в эндотелий.

Скачивания

Данные скачивания пока недоступны.