Патологическая физиология и экспериментальная терапия

Морфофункциональные особенности астроцитов и микроглии в мозге стареющих крыс при курсовом применении этилметилгидроксипиридина сукцината

Юлия Игоревна Кирова, Ольга Леонидовна Терехина, Фатима Мухамедовна Шакова — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

В развитии возраст-ассоциированных нейродегенеративных заболеваний ключевая роль отводится устойчивой провоспалительной активации микроглии и опосредованным реактивной микроглией окислительному стрессу, нейровоспалению, астроглиальной дисфункции. Конститутивная экспрессия микроглиоцитами сукцинатного рецептора SUCNR1/GPR91, формирование новых представлений о сукцинате как иммунометаболите (метабокин) и отсутствие исследований влияния сукцинатной сигнализации на морфофункциональное состояние резидентных иммунных клеток ЦНС предопределили проведение исследования. Цель работы – выявление морфофункциональных особенностей и количества астро- и микроглиоцитов в стареющем мозге крыс при курсовом применении сукцинатсодержащего препарата мексидол (этилметилгидроксипиридина сукцинат). Методика. Исследование выполнено на самцах беспородных белых крыс 3, 6 и 18 мес. Мексидол вводили в/б в дозе 100 мг/кг ежедневно, в течение 3, 7 и 14 сут. Методом вестерн-блот-анализа в лизате коры головного мозга (КГМ) определяли содержание высокоспецифичных маркеров микроглиальной (Iba1, ionized calcium binding adapter molecule 1) и астроглиальной (GFAP, glial fibrillary acidic protein) активации, а также уровень синаптофизина (SYP, маркер синаптогенеза). Методом иммуногистохимического окрашивания Iba1 и GFAP на парафиновых срезах префронтальной коры (ПФК) и гиппокампа оценивали морфологические особенности и осуществляли подсчет астро- и микроглиоцитов у молодых и старых крыс. Результаты. У старых животных уровень GFAP и Iba1 увеличивался на 30% и 20% соответственно, а содержание SYP снижалось на 25% в сравнении с молодыми животными, что свидетельствует об активации воспалительного процесса и снижении синаптогенного потенциала у старых животных. Морфологические признаки провоспалительной поляризации (короткие, слаборазветвленные, малочисленные отростки) были характерны для микро- и астроглии ПФК старых крыс. Курс мексидола вызывал в КГМ старых крыс снижение содержания GFAP и Iba1, увеличение экспрессии SYP до уровня молодых животных, увеличение количества, длины, разветвленности отростков у GFAP- и Iba1-положительных клеток, что свидетельствует о сукцинат/SUCNR1-зависимой противовоспалительной трансформации микро- и астроглии в стареющем мозге. Заключение. Исследование впервые раскрывает новые аспекты активности мексидола и сукцинатной сигнализации в мозге, что проявляется в ограничении воспалительной реакции и усилении синаптической пластичности. Сукцинатсодержащий препарат мексидол может быть использован в комплексной терапии различных неврологических патологий, ассоциированных с нейровоспалением и когнитивным дефицитом.

Проявления гипер- и дегидратации нервной ткани полей СА1 и СА3 гиппокампа после непродолжительной окклюзии и пережатия общих сонных артерий

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Цель работы – изучение структурных изменений нейрон-глиальных взаимоотношений и морфометрическая характеристика процесса отёка-набухания структур полей СА1 и СА3 гиппокампа крыс после окклюзии и перевязки общих сонных артерий. Методика. На белых крысах Wistar моделировали одностороннюю и двустороннюю окклюзию (ООСА) и перевязку (ПОСА) общих сонных артерий. У животных 1-й группы моделировали одностороннюю ООСА (30 мин, n=30), у животных 2-й и 3-й групп – двустороннюю ООСА, 20 и 40 мин соответственно (n=30 в каждой группе). В 4-й группе применяли ПОСА (n=30). Для морфологического исследования использовали гистологические (окраска гематоксилин-эозином и по Нисслю), иммуногистохимические (MAP-2, GFAP) и морфометрические методы исследования. На препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, с помощью плагинов программы ImageJ 1.53 (Find Foci) оценивали различные параметров яркости и распределения пикселей изображения. Реакции на MAP-2 и GFAP использовали для верификации клеток. Проверку статистических гипотез проводили в программе Statistica 8.0 с помощью непараметрических критериев Shapiro-Wilk W-test, Mann–Whitney U-test, Wilcoxon Matched Pairs Test, ANOVA Kraskel-Wallis и ROC анализа. Результаты. Установлено, что после ООСА и ПОСА в гиппокампе появлялось большое количество гетероморфных ярких зон отёка-набухания с высокой общей интенсивностью пикселей в пике. Максимальное их количество отмечено после ПОСА в течение всего периода наблюдения. После ООСА степень гидратации нейропиля статистически значимо изменялась (группа 2-я – p=0,03; группа 3-я – p=0,0003), уменьшаясь через 14 и 30 сут наблюдения. У животных 1-й группы преобладали умеренные обратимые проявления отёка-набухания, в группах 2-й, 3-й и 4-й на фоне нормохромных нейронов выявлены различные сочетания набухших, темных сморщенных и несморщенных отростков дендритов/перикарионов, проявления отёка периваскулярных и принейрональных отростков астроцитов. По мере увеличения степени тяжести ишемии выявлялись признаки гипергидратации астроцитарного компартмента и дегидратации нейронов. При этом в 1-й, 2-й и 3-й группах сохранялись функционально значимые возможности восстановления большей части темных нейронов и астроглии. После ПОСА происходил срыв механизмов оттока жидкости по астроцитам, формировались крупные полости со свободной жидкостью и разрушенным GFAP-позитивным цитоскелетом. Это сопровождалось дисфункцией астроцитов и, как следствие, необратимой дегидратацией и прижизненной дегенерацией темных нейронов СА1 и СА3 (пикноморфные с гомогенизацией). Заключение. После ООСА и ПОСА структурно-функциональная реорганизация нейронов полей СА1 и СА3 гиппокампа происходила на фоне гипергидратации нейропиля, перинейрональных и периваскулярных пространств (ножки астроцитов). Крайняя степень вариации этих проявлений отмечалась после ПОСА, что свидетельствовало о дисфункции и гибели большого количества астроцитов в результате чрезмерного отёка их отростков вблизи пикноморфных нейронов. При ООСА длительное сохранение признаков отёка-набухания не сопровождалось выраженной необратимой гибелью темных нейронов, большая часть этих нейронов восстанавливалась параллельно с восстановлением астроцитов. Поэтому в этих группах сохранение признаков отёка-набухания целесообразно рассматривать как условие для реализации механизмов саногенеза нервной ткани – её детоксикации.

Роль полиморфных маркеров гена IL6 в патогенезе сахарного диабета 1 типа

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Актуальность. Сахарный диабет типа 1 (ранее называемый ювенильным или инсулинозависимым) характеризуется тем, что продукция инсулина отсутствует вследствие аутоиммунной деструкции клеток поджелудочной железы, вероятно, вызванной действием факторов внешней среды на фоне генетической предрасположенности, которая проявляется в наличии функциональных однонуклеотидных замен (SNP) в генах цитокинов, ответственных за воспаление. Считается, что при длительном хроническом воспалении происходит необратимое разрушение β-клеток поджелудочной железы, и при наличии функциональных полиморфных маркёров в генах воспаления, таких как ген интерлейкин β (IL6), возможна манифестация болезни с последующей прогрессией и развитием осложнений. Цель исследования – изучение частоты распределения аллелей и генотипов ряда полиморфных маркёров гена IL6 при СД типа 1 у жителей Москвы и Московской области. Методика. В настоящую работу включено 366 больных СД типа 1 и 526 здоровых индивидов. Группу больных составили пациенты с наличием сахарного диабета типа 1 различной манифестации с общей медианой возраста 41±5 лет. Обе группы выравнены по полу и возрасту. Определение генотипов полиморфных маркёров rs1800795, rs1800796, rs1800797 и rs1554606 гена IL6 проводилось с помощью ПЦР «в реальном времени» на амплификаторе «Real-time CFX96 Touch» (Bio-Rad, США) с использованием готовой смеси для ПЦР qPCRmix-HS (Евроген, Россия) и уникальных праймеров и зондов. Результаты. В результате исследования выявлена статистически значимая ассоциация полиморфного маркёра rs1800795 гена IL6 с повышенным риском развития СД1 (χ²=9,48, OR=1,35, CI_95%=1,11-1.64, р=0,0088). Заключение. Полученные результаты дополняют информацию о механизмах возникновения и патогенезе СД типа 1. Внедрение в практику анализа полиморфных вариантов гена IL6, позволит выявить вероятность развития этой болезни и/или её прогрессирование у пациентов с аутоиммунными заболеваниями или у лиц, находящихся в группе риска.

Генетический профиль больных хроническим гепатитом С

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Введение. Хронический гепатит С (ХГС) является мультифакториальным заболеванием, в формировании которого имеют значение генетические факторы возбудителя (вирус), хозяина и условия внешней среды. В настоящее время приоритетной областью здравоохранения является оценка роли генетических маркеров при многофакторных заболеваниях. Цель – оценка роли генетических маркеров при хроническом гепатите С. Методика. Обследовано 95 больных ХГС и 50 здоровых доноров. Оценивали концентрацию васкулоэндотелиального фактора роста (vascular endothelial growth factor – VEGF), фактора некроза опухоли (tumor necrosis factor alpha –TNF-α), активность ферментов каталазы (catalase – CAT), глутатионпероксидазы (glutathione peroxidase – GPX) в сыворотке крови. Также изучали полиморфизм генов VEGFA в регионе -634G/C, TNF-α в регионе -308G/A, CAT в регионе -262G/A, GPX4 в регионе -718С/Т и IL28B в регионе C/T и оценивали генетический профиль в баллах от 0 до 10 путем суммации аллелей риска. Результаты. Развитие ХГС сопровождается активацией процессов воспаления и неоангиогенеза с повышением концентрации и TNF-α (р<0,001), и VEGF (р<0,001) при истощении ферментов антиоксидантной защиты со снижением активности CAT (р<0,001) и GPX (р<0,001). Носительство аллели С гена VEGFA в регионе -634G/C в виде генотипа СС может является фактором риска развития ХГС (χ²=7,52; р=0,01). Выявлена ассоциация полиморфизма гена CAT (G262A) и GPX4 (С718Т) со снижением активности антиоксидантных ферментов. При оценке генетического профиля в группе здоровых 86% имели низкий риск развития ХГС (0-3 балла по шкале), а среди пациентов с ХГС – 68%. При этом 32% лиц с ХГС имели умеренный риск (4-7 баллов), а у доноров эта цифра была ниже и составила 14%. Оценка генетического профиля здоровых доноров и пациентов с ХГС, показала, что среди больных ХГС чаще встречались лица, имеющие одновременно большее количество аллелей риска. Заключение. Определение генетического профиля с использованием, TNF-α в регионе -308G/A, CAT в регионе -262G/A, GPX4 в регионе -718С/Т, VEGFA в регионе -634G/C и IL28B в регионе C/T позволяет оценить риск развития и прогрессирования ХГС.

Основные биохимические маркеры при неалкогольной жировой болезни печени различной степени тяжести (экспериментальное исследование)

Татьяна Викторовна Брус, Андрей Глебович Васильев, Александр Петрович Трашков — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Введение. Своевременная диагностика лечение и профилактика неалкогольной жировой болезни печени остаются одними из наиболее актуальных медицинских и социальных проблем. Ключевую роль в изучении этиологии и механизмов патогенеза играет поиск адекватной экспериментальной модели неалкогольной жировой болезни печени. Принимая во внимание патогенетические особенности развития данной патологии, интерес представляет разработка модели с помощью воздействия на подопытных животных гиперкалорийной гепатогенной диетой, содержащей повышенное количество углеводов. Эта модель применена в настоящем исследовании. Цель исследования – анализ биохимического профиля и наиболее значимых маркеров антиоксидантной системы у крыс на фруктозоиндуцированной модели неалкогольной жировой болезни печени Методика. Отработаны модели неалкогольной жировой болезни печени различной степени тяжести у крыс: легкая степень тяжести – неалкогольный стеатоз печени и средняя степень – неалкогольный стеатогепатит. Исследование проведено на 100 самцах крыс Wistar. Моделирование неалкогольного стеатоза осуществлялось путем замены питьевой воды на 10-процентный раствор фруктозы. Крысы, у которых моделировали развитие стеатогепатита получали сухой гранурированный корм, содержащий по массе 60% фруктозы. Определяли следующие биохимические показатели: уровень глюкозы, общее содержание белков в плазме крови, концентрацию общего билирубина и его прямой фракции, активность аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, лактатдегидрогеназы и щелочной фосфатазы, уровень гомоцистеина, содержание общего холестерина, триацилглицеридов. каталазы, супероксиддисмутазы и малонового диальдегида. Результаты. Воспроизведенные нами модели характеризовались развитием билирубинемии, холестеринемии, активацией перекисного окисления липидов и супрессией антиоксидантных механизмов, цитолитическим и холестатическим синдромами. Степень нарушения обмена веществ крыс зависела от степени тяжести моделируемого заболевания. Заключение. Показана целесообразность определения биохимических маркеров: активность аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, уровень общего билирубина, триглицеридов, малонового диальдегида, супероксиддисмутазы с целью определения степени тяжести неалкогольной жировой болезни печени и своевременной коррекции метаболических нарушений.

Динамика морфологических изменений в ткани печени при необратимой электропорации в условиях возрастающей напряженности электрического поля

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Необратимая электропорация – новый метод абляции тканей, используемый в лечении нерезектабельного рака. Имеется ряд публикаций, описывающих развитие клеточной гибели посредством апоптоза при применении технологии необратимой электропорации, однако динамика эффектов необратимой электропорации остается мало освещенной. Цель исследования – сравнительная оценка изменений в ткани печени и сосудах при необратимой электропорации вызванной токами возрастающей мощности и определение минимального порогового значения напряженности электрического поля, вызывающего формирование зоны необратимой нетермической электропорации посредством апоптоза клеток на равноудаленном расстоянии между электродами. Методика. Исследование выполнено на 6-8-мес самцах белых беспородных крыс массой 240-330 г. Электропорации осуществлялась электродом состоящим из 2 рабочих игл. Животные выводились из эксперимента декапитацией на 1-е, 2-е 3-и, 7-е и 14-е сут. 1–7 серии – последовательно повышалась напряженность электрического поля от 400 до 1000 В/см, с шагом 100 В/см. При неизменных параметрах: длительность серии импульсов 0,5 с, количество импульсов в серии 8, количество серий импульсов 225/мин, вид импульса – прямоугольный биполярный, длительность 1 импульса 8 мкс, максимальный импульсный ток 7 А. Морфологически оценивали состояние гептоцитов, характер клеточной гибели. Для проведения морфометрического исследования использовали аппаратно-программный комплекс Nis-Elements AR 4.12.00 на базе исследовательского микроскопа NICON 50s, снабженного цифровой камерой NICON DS-Fi 1. Результаты. При процедуре необратимой электропорации с напряженностью электрического поля от 400, до 1000 В/см с шагом в 100 В/см отмечалось нарастание гистопатологических признаков коагуляционного некроза от минимальных проявлений при мощности 400-600 В/см до начальных 700 В/см и грубых проявлений в, так называемой, «белой зоне» при 1000В/см. При повышении напряженности более 900 В/см отмечалось преобладание некротических изменений над апоптотическими в межэлектродном пространстве. При низкой напряженности электрического поля 400–700 В/см в ряде репрезентативных образцов выявлялись скопления интактных жизнеспособных клеток без признаков повреждения. Заключение. Проведенные исследования необратимой электропорации выявили комплекс изменений обусловленных термическим некрозом тканей в области расположения электродов. Морфологические признаки клеточной гибели посредством апоптоза продемонстрированы во всех сравниваемых группах, однако изменения носят сочетанный характер и вклад коагуляционных изменений нарастает по мере роста напряженности электрического поля. Минимально достаточная напряженность электрического поля, позволяющая получить апоптотические изменения клеток в ткани печени на всем протяжении между электродами соответствует 900 В/см, при которой процессы термического коагуляционного некроза не преобладают над апоптотическими изменениями.

Автономная дисфункция у пациентов с постковидным синдромом

Марина Юрьевна Максимова, Анна Сергеевна Галанина — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Введение. В условиях пандемии SARS-CoV-2 (COVID-19) растет количество пациентов с последствиями перенесенной инфекции. Это состояние получило название постковидный синдром или длительный (затянувшийся) COVID-19. Цель исследования -- изучение взаимосвязи между клиническими проявлениями постковидного синдрома и вегетативной дисфункцией. Методика. В исследование были включены 35 пациентов (15 мужчин и 20 женщин) в возрасте от 23 до 49 лет, обратившиеся к неврологу амбулаторно с остаточными неврологическими симптомами после перенесенного COVID-19. В контрольную группу было включено 20 здоровых лиц. Для оценки состояния вегетативной нервной системы использовались компьютерный многофункциональный комплекс «Нейро-МВП-4» и программа «Поли-Спектр-Ритм» (Нейрософт). Исследование также включало оценку реакций на стандартизированные стимулы (ортостатическая проба, проба Вальсальвы, проба с глубоким управляемым дыханием, проба с изометрическим сокращением) и анализ кардиоваскулярных проб по Д. Ивингу Результаты. У пациентов с постковидным синдромом по сравнению с группой здоровых лиц наблюдается резкое снижение фоновых временных (SDNN, RRNN, RMSSD, RNN50) и спектральных (LF, HF) характеристик вариабельности ритма сердца. При сравнении групп между собой после ортостатической пробы у пациентов с постковидным синдромом определялись более низкие показатели RRNN и LF, а также более высокий показатель HF. Во время пробы Вальсальвы в группе пациентов с постковидным синдромом по сравнению с группой здоровых лиц отмечены более низкие показатели SDNN, RRNN, LF. Проба с глубоким дыханием у пациентов с постковидным синдромом характеризовалась более низким RRNN и более высоким НF, а проба с изометрическим сокращением – более высокими показателями RMSSD и HF. Заключение. У пациентов с постковидным синдромом показатели кардиоваскулярных тестов свидетельствуют о дисбалансе вегетативной нервной системы с преобладанием активности симпатической регуляции.

Полиморфизм эндотелиальных клеток на поверхности створок митрального клапана и сосудов микроциркуляторного русла при инфекционном эндокардите

Ринат Авхадиевич Мухамадияров, Антон Геннадьевич Кутихин — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Цель работы – изучение структурных особенностей эндотелия, микрососудистого русла, интерстициальных клеток створок митрального клапана при инфекционном эндокардите (ИЭ) и оценка их роли в развитии патологического процесса. Методика. Исследовано 14 митральных клапанов, извлеченных при хирургических вмешательствах у пациентов с инфекционным эндокардитом (ИЭ). Образцы фиксировали в забуференном параформальдегиде с постфиксацией в тетраокиси осмия. После обезвоживания в спиртах возрастающей концентрации и ацетоне образцы помещали в эпоксидную смолу. После полимеризации смолы образцы шлифовали, а затем полировали до нужной глубины образца. Для повышения электронного контраста образцы обрабатывали спиртовым раствором уранилацетата в процессе обезвоживания и цитратом свинца по Рейнольдсу после полировки эпоксидных блоков. Образцы визуализировали посредством сканирующей электронной микроскопии с детекцией обратно рассеянных электронов при ускоряющем напряжении 15 кВ. Результаты. На поверхности створок были выявлены структурные изменения эндотелиальных клеток, степень изменений зависела от состояния находящихся под ними участков створок. Минимальные изменения структуры наблюдали при максимальной сохранности структуры, максимальные вблизи зон некрозов и других типовых проявлениях ИЭ. Одновременно со структурными изменениями эндотелия отмечали активацию интерстициальных клеток, которые, по мере развития патологического процесса, мигрировали в направлении эндотелия, образуя параллельный ему слой клеток. В сосудах микроциркуляторного русла обращал внимание полиморфизм эндотелиоцитов, отмечался диапедез с миграцией гранулоцитов в толщу створок. В пораженных участках створок выявлялись признаки неоангиогенеза. Заключение. Полученные результаты указывают на комплекс изменений направленных на поддержание структурной целостности эндотелия и самих створок в целом. Конечным результатом этих процессов является замещение поврежденных клеток эндотелия интерстициальными клетками и активизация неоангиогенеза в толще створок.

Молекулярные механизмы, контролирующие выраженность геморрагии при ингибировании синтеза ТхА2 в тромбоцитах

Эдуард Федорович Баринов, Юрий Юрьевич Малинин, Хачен Владимирович Григорян — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Цель исследования – оценка патогенетических и компенсаторных механизмов, участвующих в поддержании и ограничении гематурии при длительном назначении НПВП пациентам с нефролитиазом. Методика. В исследование включены пациенты (21 человек) с нефролитиазом, у которых для анальгезии назначались высокие дозы НПВП в течении 9 сут. Тяжесть гематурии и лейкоцитурии оценивали на момент госпитализации, через 24 ч и 48 ч после уретеролитотрипсии (УЛТ) в верхнем отделе мочеточника. Статистический анализ осуществлялся с использованием пакета MedCalc. В исследовании применяли участвующие в модуляции тромбогенеза агонисты рецепторов в частности: АДФ, АТФ, ангиотензин-2, адреналин, коллаген IV-типа, фактор активации тромбоцитов (ФАТ), аденозин, изадрин. Агонисты использовали в концентрации ЕС₅₀ и ЕС₁₀. Анализ функциональной активности рецепторов и оценку агрегации АТц проводили турбидиметрическим методом на анализаторе ChronoLog (США). Анализ агрегатограмм проводили по следующим параметрам: амплитуда агрегации тромбоцитов; максимальный наклон кривой (Slope); площадь под кривой (AUC). Результаты. На фоне назначения пациентам НПВП через 48 ч после УЛТ сохранялась частота гематурии; выраженность микрогематурии уменьшилась (р < 0,001) по сравнению с уровнем через 24 ч после оперативного вмешательства. Уровень лейкоцитурии снижался (р < 0,001) через 24 ч и 48 ч после УЛТ. Гематурия поддерживалась на фоне гиперреактивности α₂-адренорецептора, нормореактивности ФАТ-рецептора и пуринового Р2Х₁-рецептора. При сравнении параметров кривых агрегации установлено, что максимальный эффект агрегации Тц воспроизводился при взаимодействии α₂-адренорецептора и Р2Х₁-рецептора. Менее значимый эффект синергизма выявлен при одновременной стимуляции α₂-адренорецептора и ФАТ-рецептора, а также Р2Х₁-рецептора и ФАТ-рецептора. Заключение. Анализ функциональной активности рецепторов на тромбоцитах после УЛИ при назначении высоких доз НПВП свидетельствует, что активация симпато-адреналовой системы является триггером компенсаторной реакции направленной на ограничение гематурии. Эффективность компенсаторной реакции гемостаза усиливается в результате потенцирования проагрегантных эффектов α₂-адренорецептора, Р2Х₁-рецептора и ФАТ-рецептора.

D-глюкозамин индуцирует различные формы гибели опухолевых клеток

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Введение. D-глюкозамин – природный аминосахар, который используются в медицинской практике поскольку проявляет противовоспалительное, антиоксидантное, антивозрастное, противофиброзное, нейропротекторное и кардиозащитное действие. Цель работы – оценка влияния D-глюкозамина на пролиферацию, апоптоз и аутофагию в нейроцитах крыс линии РС12 в норме и в условиях аминокислотного и углеводного голодания. Методика. Работа выполнена на клеточной линии PC 12, которая представляет собой феохромоцитому крыс. Клетки имеют физиологические и биохимические характеристики нейронов, способны продуцировать катехоламины и широко используются в исследованиях болезни Альцгеймера и Паркинсона. Клетки выращивали в условиях аминокислотного голодания и/или при низком уровне глюкозы (углеводное голодание). Для оценки активности деления клеток и клеточной гибели использовали проточную цитометрию, морфологический анализ состава и размера клеточных популяций с использованием специфических красителей. Оценку размера везикул, образующихся в результате аутофагии, проводили методом лазерной корреляционной спектроскопии. Результаты. Культивирование клеток линии РС12 в среде с низким содержанием глюкозы и аминокислот запускает механизм апоптотической гибели, но добавление D-глюкозамина в концентрации 1 ммоль/л оказывает протекторное воздействие и снижает уровень популяции <2c. Добавление D-глюкозамина в концентрациях 5 ммоль/и 10 ммоль/л снижало выживаемость клеток и уменьшало количество колоний. Прижизненная окраска клеток акридиновым оранжевым не выявила фрагментации ядерного материала, окраска клеток монодансилкадаверином позволила наблюдать множество аутофагальных вакуолей. Наличие свободной аминогруппы у молекулы D-глюкозамина является фактором, вызывающим аутофагию большей интенсивности. Микровезикулы, формирующиеся в результате отпочковывания плазматической мембраны, образуют две фракции частиц: одна в пределах 200, другая – 1000 нм. Заключение. Цитотоксический эффект D-глюкозамина на клетках РС12 реализуется через индукцию аутофагии, вероятно, через ингибирование фосфорилирования m-TOR, что делает этот природный представитель аминосахаров возможным конкурентом рапамицина. D-глюкозамин безопасен даже при длительном применении у людей, включая пациентов с нарушенной толерантностью к глюкозе или диабетом.

Мочевая кислота – мишень для действия электромагнитного излучения

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Цель исследования – оценка влияния электромагнитного излучения дециметрового диапазона на содержание мочевой кислоты в плазме крови крыс и выявление корреляционных связей уровня мочевой кислоты с основными показателями антиоксидантной защиты. Методика. Эксперименты выполнены на крысах, которые находились под действием электромагнитного поля дециметрового диапазона в течение 3 мес. Спектрофотометрически в динамике через 1, 2 и 3 мес определяли в плазме крови содержание мочевой кислоты. Проведен корреляционный анализ взаимосвязи уровня мочевой кислоты и основного антиоксиданта плазмы крови – церулоплазмина , а также уровня мочевой кислоты и главного неферментативного антиоксиданта эритроцитов – глутатиона. Результаты. Содержание животных в течение 3 мес под действием электромагнитного излучения дециметрового диапазона приводит к увеличению в плазме крови уровня мочевой кислоты наряду с увеличением содержания церулоплазмина и меди. В эритроцитах периферической крови при этом увеличивалось содержание восстановленного глутатиона. Установлены тесные корреляционные связи содержания мочевой кислоты с уровнем церулоплазмина и двухвалентной меди (Сu²⁺) в плазме крови, а также уровня мочевой кислоты с содержанием глутатиона в эритроцитах крыс. Заключение. Содержание животных в течение 3 мес под действием электромагнитного излучения дециметрового диапазона приводит к увеличению содержания мочевой кислоты в плазме крови крыс. Мочевая кислота наряду с церулоплазмином и глутатионом является мишенью для действия электромагнитного излучения, при этом изменения мочевой кислоты более значимы.

Локальный амилоидоз шишковидной железы

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Введение. Шишковидная железа (эпифиз), кровоснабжение которой осуществляется от ветвей а. chorioidea posterior, а отток крови происходит в большую мозговую вену или её приток, может подвергаться локальному амилоидному поражению без вовлечения в процесс больших полушарий, то есть, представлять собой самостоятельный процесс не связанный с болезнью Альцгеймера. Цель исследования – выявление частоты встречаемости локального амилоидоза эпифиза у взрослых людей и изучение его возможной связи с кальцинозом железы. Методика. Проведено патогистологическое исследование шишковидных желез 92 суицидентов и 69 лиц, погибших в результате насильственных действий или различных несчастных случаев (группа сравнения). Всего 37 женщин и 124 мужчины. Средний возраст суицидиентов мужчин – 41,0±13,0, женщин – 57,0±15,0, лиц группы сравнения – 41,0±13,0 и 54,0±13,0 соответственно. Для выявления амилоида и кальцинатов использовали окраску гистопрепаратов конго красным, а также тиофлавином Т. Тяжесть амилоидного поражения и количество кальцинатов в шишковидной железе оценивали в условных баллах. Результаты. При окрашивании образцов конго красным вне зависимости от возраста и причины смерти в 48,5% случаев было выявлено различной тяжести амилоидное поражение шишковидной железы и наличие кальцинатов. Частота встречаемости, тяжесть амилоидного поражения железы и количество кальцинатов не зависели от возраста, пола и причин смерти (анализ различий частот проведен по тесту Колмогорова-Смирнова с поправкой Лиллиефорса). В образцах от суицидентов выявлено зависимое от тяжести амилоидного процесса статистически значимое увеличение массы шишковидной железы по сравнению с массой желез умерших в результате насильственной смерти и несчастных случаев. При отсутствии признаков амилоидного поражения различий в массе эпифизов «суицидентов» и «несуицидентов» не обнаружено. Причиной локального амилоидоза шишковидной железы, возможно является прижизненный гематогенный занос бактерий, который в том числе приводит к образованию кальцинатов. Заключение. Примерно у 50% популяции был выявлен бессимптомный локальный амилоидоз эпифиза; наличие амилоидоза не являлось причиной суицида; в материале от «суицидентов» выявлена зависимость влажной массы железы от тяжести амилоидного поражения

Молекулярные стимулы фиброгенной активации звёздчатых клеток печени

Дмитрий Викторович Гарбузенко — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Цель обзора – оценка роли молекулярных стимулов фиброгенной активации звёздчатых клеток печени (ЗКП), играющих важную роль в печёночном фиброгенезе. Показано, что для переформатирования неподвижных ЗКП в активированный миофибробластоподобный фенотип требуется изменение экспрессии нескольких сотен различных генов. Ряд стимулирующих факторов способны влиять на рецепторы для множества паракринных и аутокринных индукторов этого процесса. Возможными ключевыми регуляторами активации ЗКП являются мультидоменная сигнальная молекула GIV/Girdin и метил-CpG-связывающий белок 2 (MеCP2). Кроме того, их трансдифференцировка может быть обусловлена эпигенетическими механизмами, которые включают метилирование ДНК и модификации гистонов, и контролируются многочисленными некодирующими РНК. Сохранять экспансию и профиброгенную активность ЗКП при постоянном воздействии агрессивного агента способно устойчивое увеличение сигнальной трансдукции hedgehog (Hh). Содействует печёночному фиброгенезу и аутофагия в ЗКП. Под влиянием молекулярных стимулов ЗКП вступают в клеточный цикл и проходят фазу начальной, а затем устойчивой активации. В это время происходят многочисленные изменения в транскрипции генов коллагена I типа, α-гладкомышечного актина (α-SMA), трансформирующего фактора роста (TGF)-β1 и его рецепторов, матриксной металлопротеиназы (ММП)-2, тканевых ингибиторов матриксных металлопротеиназ (ТИМП)-1 и 2, чему способствуют отсутствующие в неподвижных ЗКП транскрипционные факторы Ets-1, Mef2, CREB, Egr-1, JunD, рецептор витамина D, CCAAT/энхансер-связывающий белок β (C/EBP-β) и другие. Понимание патофизиологических механизмов активации ЗКП является чрезвычайно важным для разработки таргетной антифибротической терапии. Внедрение её в клиническую практику позволит улучшить прогноз при хронических заболеваниях печени и повысить качество жизни пациентов.

Шипики дендритов

Александр Александрович Пальцын, Надежда Борисовна Свиридкина — Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

Мозг осуществляет постоянное и чаще достаточно успешное приспособление организма к меняющимся условиям среды. Важнейшим структурно-функциональным проявлением этой приспособительной реакции мозга является адекватное ситуации изменение числа, внешней формы, внутреннего строения, скорости структурных перестроек, химического состава воспринимающих сигнал элементов синапсов -- дендритных шипиков. При болезни Альцгеймера патология шипиков обнаруживается раньше клинических проявлений. Первым ученым, понявшим роль шипиков был Рамон Кахаль.

Стерильное воспаление при преэклампсии и угрозе преждевременных родов

Вт, 15 мар 2022 00:00:00 +0000

В обзоре обсуждаются новые данные о роли стерильного воспаления при таких ключевых осложнениях беременности, как преэклампсия и преждевременные роды. Рассмотрены молекулярные паттерны, связанные с повреждением с позиций сигналов опасности как активаторы врожденной иммунной системы. Проведен анализ недавно открытых структур инфламмaсом при беременности и их возможной роли в индукции и поддержании стерильного воспаления, играющего важную роль в нарушении нормального течения беременности, и, как следствие этого, изменения вектора развития плода. Приведены данные, доказывающие участие некоторых аларминов в индукции воспаления как при преэклампсии, так и при преждевременных родах. Подобная универсальность не исключает специфики воспаления, которая до конца пока не ясна. Обсуждаются новые подходы к терапии стерильного воспаления при рассматриваемой патологии.