Патологическая физиология и экспериментальная терапия

Аберрантное метилирование и экспрессия белок-кодирующих генов системы деметилирования и генов длинных некодирующих РНК при светлоклеточном раке почки

Анна Дмитриевна Селезнева — 2025-03-29

Предпосылки. Ключевую роль в развитии и прогрессии опухолей играют эпигенетические изменения. В частности, результаты многочисленных исследований однозначно подтверждают вовлеченность в онкогенез аномального метилирования ДНК, в промоторных CpG-островках ряда белок-кодирующих генов (БКГ), генов микроРНК и длинных некодирующих РНК (днРНК). Результатом аномального метилирования ДНК может стать ингибирование транскрипции генов-супрессоров, обеспечивающих в нормальных клетках защиту от злокачественной трансформации. Одной из причин, приводящей к аномальному метилированию ДНК, может быть нарушение в работе генов семейства диоксигеназ ТЕТ. Целью настоящей работы является исследование роли изменений уровня метилирования и экспрессии белок-кодирующих генов TET1, TET2 и генов днРНК ADAMTS9-AS2, SNHG6, GAS5 в патогенезе светлоклеточного рака почки.

Методика. В работе использовали парные образцы операционного материала (опухоль/прилежащая гистологически нормальная ткань) от 47 пациентов с диагнозом «светлоклеточный рак почки», которые были собраны и клинически охарактеризованы в НИИ клинической онкологии ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина». Уровень метилирования анализировали с помощью количественной метил-специфичной ПЦР с детекцией в реальном времени. Для оценки уровня экспрессии проводили реакцию обратной транскрипции с последующей амплификацией кДНК с помощью SYBR Green ПЦР в реальном времени. Для оценки значимости различий между исследуемыми группами применяли непараметрический критерий Манна–Уитни для независимых выборок. Для исследования влияния метилирования исследуемых генов на их экспрессию, а также анализа коэкспрессии и кометилирования БКГ и генов днРНК рассчитывали коэффициент корреляции Спирмена. Все статистические расчеты проводили в программе IBM SPSS Statistics 29. Различия считали значимыми при р≤0,05.

Результаты. Впервые показано статистически значимое увеличение уровня метилирования генов TET1, ADAMTS9-AS2, SNHG6 и GAS5 в ткани опухоли больных скПКР по сравнению с нормальной тканью. Для генов TET1, ADAMTS9-AS2, SNHG6 и GAS5 также зафиксировано статистически значимое снижение уровня их экспрессии в опухолевых образцах, тогда как для гена TET2 отмечено увеличение уровня экспрессии в опухолевой ткани. Выявлены значимые ассоциации статуса метилирования генов TET1, ADAMTS9-AS2, SNHG6, GAS5 – со стадией заболевания и наличием метастазов в лимфатические узлы, а TET1, ADAMTS9-AS2, SNHG6 с размером первичной опухоли. Кроме того, обнаружено статистически значимое снижение уровня экспрессии гена ADAMTS9-AS2 на более поздних (III-IV) стадиях заболевания, а гена SNHG6 — при увеличении размера новообразования. Показана статистически значимая отрицательная корреляция между изменением статуса метилирования промоторных CpG-островков генов ADAMTS9-AS2, SNHG6, GAS5 и изменением уровня их экспрессии. Выявлена достоверная корреляция между уровнями метилирования промоторных областей для трех пар генов «днРНК-БКГ» (ADAMTS9-AS2 / SNHG6 – TET1, GAS5 – TET2) и между уровнями экспрессии для двух пар генов «днРНК-мРНК» (GAS5 – TET1, SNHG6 – TET2).

Заключение. Результаты исследования свидетельствуют о вовлеченности аберрантного метилирования в возникновение и прогрессию светлоклеточного рака почки, а также указывают на потенциальную применимость выявленных закономерностей в прогностике и диагностике данного заболевания.

Изменения метаболизма и состояния клеток системы крови и костного мозга при курсовом применении Лактоферрина на различных этапах развития сахарного диабета 2 типа

Михаил Юрьевич Карганов — 2025-03-29

Цель – изучить динамику метаболизма и состояние клеток крови и костного мозга при курсовом применении Лактоферрина (Лф) в различные периоды прогрессирующего развития сахарного диабета 2 типа (СД2).

Методика. Опыты выполнены на 40 мышах db/db c генетической моделью СД2 и на 10 мышах db/+m (здоровый контроль). Мыши db/db составили 2 группы: 1 – СД2 контроль (n=10); 2 – состояла из 3 подгрупп с СД2 (n=30), в которых применяли 1% питьевой раствор Лф сроком до 2 мес на 3-х стадиях различной степени тяжести состояния животного: I стадия адаптации; II стадия прогрессирующей дезадаптации; III стадия декомпенсации. На этих стадиях в динамике исследовали уровень глюкозы в крови, вес животного, показатель окислительного метаболизма (ПОМ) в тканях, состояние клеток крови и костного мозга. Статистическую обработку результатов проводили с предварительным использованием теста Шапиро–Уилкса. Достоверность различий с контролем оценивали с помощью параметрического критерия t-Стьюдента, при р<0,05.

Результаты. Применение Лф на I и II стадии СД2 стабилизировало уровень глюкозы и вес животных, а после отмены Лф способствовало нормализации этих показателей. К концу применения Лф на III стадии СД2 эти показатели резко снижались, и животные быстро погибали. ПОМ при введении Лф на I, II и III стадии СД2 всегда снижался, но после отмены Лф – ПОМ повышался и становился выше исходного уровня на I и II стадиях СД2. Соответствующие стресс-адаптивные изменения были выявлены также для клеток крови и костного мозга, развитие которых осуществлялось при участии механизмов программируемой гибели клеток

Заключение. Лактоферрин при курсовом применении для коррекции клинических проявлений СД2 действует как мощный адаптоген и способен оказать адьювантное воздействие на метаболизм и состояние клеток системы крови и костного мозга, но лишь при сохранившихся в организме адаптационных резервах.

Агрегация мутантной формы белка альфа-синуклеина α-Syn A53T в клетках нейронального типа SH-SY5Y: валидация модели

Надежда Евгеньевна Пукаева — 2025-03-29

Введение. Общим патогенетическим событием при развитии нейродегенеративных заболеваний является агрегация специфических белков в нервной системе. Агрегация белка α-синуклеина обнаруживается при болезни Паркинсона (БП), деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии и др. Исходя из этого, основным направлением поиска потенциальной терапии является разработка препаратов с антиагрегационными свойствами, которые способны предотвращать образование агрегатов, либо способствовать разрушению уже сформированных отложений, и таким образом, приостанавливать развитие патологического процесса. Для поиска и отбора таких препаратов необходимо использовать относительно простые и легко воспроизводимые тест-системы, в которых можно проверять их эффективность. Удобным инструментом для этих целей могут служить клеточные линии, экспрессирующие патогенные формы белков человека, связанные с развитием заболеваний. Цель. Получение и характеристика клеточной модели агрегации α-синуклеина человека на основе генетического конструкта с патогенной мутацией A53T, ассоциированной с семейной формой БП.

Методика. Клетки нейробластомы человека SH-SY5Y трансфецировали плазмидным вектором, кодирующим α-синуклеин с мутацией A53T. Агрегацию белка стимулировали обработкой ингибитором протеасом MG132. Анализ проводили методом флуоресцентной и конфокальной микроскопии после иммуноцитохимического окрашивания белка в клетках. Для валидации модели была проведена оценка действия соединения – артемизинина, на развитие агрегации.

Результаты. Получена и охарактеризована модель агрегации α-синуклеина в клетках нейрональной линии человека, в которой воспроизводятся основные молекулярно-клеточные признаки характерные для синуклеинопатии. В клетках формировались белковые отложения нескольких морфологических типов, отражающих различные этапы агрегации. Ингибирование функции убиквитин-протеасомной системы приводило к значительному усилению агрегации и клеточной гибели. Соединение артемизинин, обладающее нейропротекторными свойствами, снижало общее число клеток с агрегатами, ингибируя накопление ранних продуктов агрегации.

Заключение. Полученная модельная система может быть использована для направленного поиска нейропротекторных препаратов, способных эффективно блокировать патологическую агрегацию α-синуклеина.

Экзосомальные микроРНК в патогенезе идиопатического мужского бесплодия

Эльмира Фанисовна Галимова — 2025-03-29

Введение. Исследования последних лет сосредоточены на поиске новых информативных методов диагностики мужского бесплодия, которые позволили бы полнее характеризовать функциональную эффективность сперматозоидов. Одним из таких методов, на который возлагаются большие надежды, стала оценка экспрессии малых некодирующих РНК – микроРНК. Для этих молекул характерна способность модулировать различные этапы сперматогенеза путем изменения регуляции генов. Благодаря этому их скрининговая оценка позволит не только расширить диагностические возможности в клинике, но и глубже исследовать механизмы идиопатического мужского бесплодия.

Цель исследования: изучить возможность использования экзосомальных микроРНК miR-20a, miR-135a, miR-34b, miR-449в, miR-449с в качестве маркеров мужского бесплодия и оценить зависимость эффективности программ ВРТ от уровня их экспрессии.

Методика. В основную группу вошли пациенты, вступающие в программу ВРТ (вспомогательные репродуктивные технологии) с установленным диагнозом идиопатического мужского бесплодия (n=30), в контрольную – супружеские пары с женским бесплодием трубного происхождения (n=19). Выделение и изоляция экзосомальной микроРНК, содержащейся во внеклеточных везикулах эякулята проводилось с помощью набора регентов exoRNeasy Midi. Для оценки экспрессии экзосомальных микроРНК (miR-20a, miR-135a, miR-34b, miR-449в, miR-449с и контрольной miR-16) использовалась система miRCURY LNA miRNA SYBR® Green PCR System.

Результаты. Экспрессия экзосомальных miR-449с и miR-135a была значимо снижена в основной группе (р=0,03156 и р=0,0477, соответственно). Также отмечена тенденция к снижению экспрессии miR-20a, miR-34b и miR-449в. С большой достоверностью уровень экспрессии miR-34b, miR-449в, и miR-449с и miR-135a имел прямую зависимость с эффективностью программ ВРТ. Сила корреляционной связи вышеописанных отношений по шкале Чеддока была умеренной.

Заключение. Исследованные нами микроРНК могут быть использованы в качестве диагностического маркера мужской инфертильности, а также для оценки эффективности процессов оплодотворения и формирования эмбриона.

Ингибирование экспрессии гена LGALS9 активирует Т-клеточно-опосредованную цитотоксичность в опухоли почки

Анна Юрьевна Кузеванова — 2025-03-27

Поиск новых подходов иммунотерапии рака почки является актуальной задачей, решение которой будет способствовать улучшению качества лечения и снижению доли больных с иммуноопосредованными нежелательными явлениями. В этой связи разработка новых лекарственных средств на основе механизма РНК-интерференции представляется одним из перспективных направлений для решения поставленной задачи, в частности для расширения спектра терапевтических мишеней с целью подавления молекулярных механизмов ускользания клеток опухоли от действия иммунного надзора. Одной из таких мишеней является ген LGALS9. Цель исследования – провести анализ уровня экспрессии генов CD274 и LGALS9 в образцах ткани рака почки, полученных от российских больных. Оценить потенциальный эффект ингибирования экспрессии гена LGALS9 в клетках первичной опухоли почки на усиление опосредованного Т-клеточного цитолиза при совместном культивировании.

Методика. Оценку уровня экспрессии генов CD274 и LGALS9 в парных образцах опухоль/норма проводили с использованием количественной ПЦР. Аутологичные Т-лимфоциты выделяли из цельной крови больного, полученной за 2 ч до начала хирургического лечения. Первичную культуру клеток опухоли получали в течение 2-х ч после хирургического лечения. Липосомальный перенос РНК-дуплексов к генам LGALS9 и CD274 проводили за 24 ч до внесения аутологичных Т-лимфоцитов. Цитотоксический эффект оценивали с использованием биосенсорной технологии RTCA хCELLigence (ACEA Biosciences, США) по прошествии 24-х часов совместного культивирования.

Результаты. На выборке из 108 парных образцов показано, что повышение уровня экспрессии гена LGALS9 наблюдается значительно чаще, чем повышение уровня экспрессии гена CD274. Разработанные миРНК к генам LGALS9 и CD274 обеспечили эффективное подавление экспрессии обоих генов. Применение липосомальных препаратов, на основе разработанных миРНК способствовало активации цитотоксических свойств аутологичных Т-лимфоцитов у пациентов, в опухоли которых имела место повышенная экспрессия гена LGALS9. Показано, что опосредованный Т-клеточный цитолиз может быть активирован после внесения в культуру липосомальных комплексов с миРНК к гену LGALS9.

Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о терапевтическом потенциале подавления экспрессии гена LGALS9 в клетках опухоли почки для активации цитотоксического действия Т-лимфоцитов.

Изучение влияния хлорида лития на уровень провоспалительных цитокинов после черепно-мозговой травмы

Денис Тамазович Шарикадзе — 2025-03-27

Введение. Черепно-мозговая травма – актуальная проблема XXI века, находящаяся на стыке социально-правовых и медицинских наук. Научный поиск препарата, способного улучшить клинический исход заболевания, несомненно, является приоритетной задачей. Цель работы – изучить влияние хлорида лития на уровень провоспалительных цитокинов при моделировании открытой черепно-мозговой травмы (ОЧМТ) у крыс.

Методика. Эксперименты проведены на крысах-самцах Вистар, разделенных на группы: 1) Интактные; 2) Контроль; 3) ОЧМТ+Литий 63 мг/кг. Исследование выполнено с помощью оценки уровня мРНК в мозге крыс для генов провоспалительных цитокинов IL-1beta, IL-6 и TNF-α методом ПЦР в реальном времени.

Результаты. Моделирование ОЧМТ статистически значимо повышало уровень IL-1beta в перифокальной зоне повреждения головного мозга крыс до 339±45 отн. ед. в сравнении с интактной группой (р=0,007), а применение хлорида лития статистически значимо снижало уровень IL-1beta по отношению к группе Контроль (р=0,001). Моделирование ОЧМТ статистически значимо повышало уровень IL-6 в перифокальной зоне травматического повреждения до 155±15 отн. ед. в сравнении с интактным мозгом (р=0,04). Применение хлорида лития в дозе 63 мг/кг статистически не значимо снижало уровень IL-6 по отношению к группе Контроль (р=0,08). Моделирование ОЧМТ статистически значимо повышало уровень TNF-α в перифокальной зоне травматического повреждения до 129±32 отн. ед. в сравнение с интактным мозгом (р=0,04). Применение хлорида лития в дозе 63 мг/кг не влияло на уровень TNF-α по отношению к группе Контроль (р=0,1).

Заключение. Применение хлорида лития в дозе 63 мг/кг после открытой черепно-мозговой травмы у крыс статистически значимо снижает уровень цитокина IL-1beta.

Коагулянтные эффекты композитов хитозана с аминокислотами (аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, цистеин) in vitro

Людмила Анисимовна Ляпина — 2025-03-27

Введение. Одной из проблем современной медицины и физиологии является нормализация процессов свертывания крови в организме как здорового индивидуума, так и больного, особенно в условиях гипокоагуляции. Известен полисахарид хитозан, обладающий кровоостанавливающими свойствами, сочетающимися с антиоксидантными, ранозаживляющими и др. Цель – получить наиболее эффективное по коагулянтным свойствам соединение хитозана с аминокислотами и изучить его влияние на систему гемостаза в условиях in vitro.

Методика. В исследованиях in vitro изучены коагулянтные свойства трех новых композитов (соединений) хитозана (ХТЗ) с аминокислотами – аспарагиновой кислотой (АК), глутаминовой кислотой (ГК), цистеином (Ц). Использованы коагулологические методы, включающие изучение первичного (тест агрегации тромбоцитов) и вторичного (тесты активированного частичного тромбопластинового времени – АЧТВ, тромбинового времени – ТВ и протромбинового времени – ПВ) гемостаза. Забор крови у животных (крыс) производили с использованием золетил-ксилазинового наркоза (золетил 15 мг/кг, ксилазин – 8 мг/кг массы тела, в/м).

Результаты. Выявлено, что все соединения в той или иной степени проявили гемостатическое действие относительно контроля с физиологическим раствором. Активация процессов агрегации тромбоцитов максимально превышала значения в контрольной группе на 13, 16 и 25% под влиянием соединений ХТЗ-АК, ХТЗ-ГК и ХТЗ-Ц соответственно. Обнаружено, что эти композиты также в значительной степени усиливали и плазменный гемостаз. Так, ХТЗ-Ц максимально снижал тромбиновое время (ТВ) – на 32%, протромбиновое время (ПВ) – на 10% по сравнению с контролем. Композит ХТЗ-АК подавлял активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) на 14%, ПВ – на 19%, в то время как композит ХТЗ-ГК укорачивал ПВ на 25% относительно контроля.

Заключение. Наилучшим коагулянтом по влиянию на первичный гемостаз установлен композит ХТЗ-Ц, на плазменный гемостаз – ХТЗ-ГК (по влиянию на внешний путь свертывания), ХТЗ-АК (по влиянию на внутренний путь свертывания) и ХТЗ-Ц (по влиянию на общий путь свертывания крови).

Содержание продуктов гликоксидации в ротовой жидкости коррелирует с возрастом

Максим Александрович Копенкин — 2025-03-27

Введение. Считают, что одним из механизмов старения является окислительный стресс, продукты реакций которого могут быть рассмотрены как потенциальные биомаркеры старения. Цель исследования – оценить возрастные особенности содержания малонового диальдегида и конечных продуктов гликирования в ротовой жидкости практически здоровых лиц различных возрастных групп и их возможное значение как потенциальных биомакеров старения.

Методика. Образцы ротовой жидкости были получены у 88 практически здоровых людей детского (n=22), молодого (n=26), зрелого (n=20) и пожилого (n=20) возраста. Методом твердофазного иммуноферментного анализа определяли малоновый диальдегид (ELISA Kit for Malondialdehyde, Cloud-Clone, КНР) и конечные продукты гликирования (ELISA Kit for Advanced Glycation End Product, Cloud-Clone, КНР). Для учёта параметров разведения и вязкости ротовой жидкости непосредственно полученные результаты стандартизировались методом пересчёта на концентрацию общего белка пробы (набор Mindray, КНР).

Результаты. Уровень малонового диальдегида в ротовой жидкости не имел различий между рассмотренными возрастными группами. Содержание конечных продуктов гликирования увеличивалось у участников пожилого возраста как до стандартизации, так и после. Мы установили, что непосредственная и стандартизованная концентрации конечных продуктов гликирования коррелировали с возрастом. Методом простой линейной регрессии была охарактеризована линейная зависимость данного параметра с хронологическим возрастом.

Заключение. Выявленные возрастные особенности содержания конечных продуктов гликирования в ротовой жидкости позволяют рассматривать данные соединения в качестве потенциальных кандидатов на роль биомаркеров старения.

Пародонтит и окислительный стресс: современные тенденции в изучении патогенетической взаимосвязи и способы коррекции

Марина Александровна Даренская — 2025-03-14

В обзоре отражены современные представления о патогенетической роли реакций окислительного стресса и недостаточности факторов антиоксидантной защиты в развитии воспалительных заболеваний пародонта, основанные на анализе результатов экспериментальных и клинических исследований. Патогенез данного рода заболеваний является многофакторным, и, как правило, включает взаимодействие процесса биопленкообразования, предрасполагающих факторов и иммуногенности организма. Доказана тесная связь пародонтита, как воспалительного процесса, с сердечно-сосудистыми, нейродегенеративными, аутоиммунными, а также онкологическими заболеваниями. В последние годы большое внимание уделяется активным формам кислорода (АФК) в связи с их центральной ролью в прогрессировании многих воспалительных заболеваний, в том числе связанных с тканями пародонта. При пародонтите выделено шесть ключевых генов окислительного стресса (ОС) (CXCR4, SELL, FCGR3B, FCGR2B, PECAM1 и ITGAL), в основном связанных с межклеточной адгезией лейкоцитов, фагоцитозом и клеточной экстравазацией. У пациентов с пародонтитом отмечается повышенное количество определенных фенотипов нейтрофилов с избыточной реактивностью в виде усиленной продукции АФК и провоспалительных медиаторов, что способствует нарушению их хемотаксической способности. Регистрируются как местные, так и системные нарушения редокс-баланса. При пародонтите наблюдается повышенный уровень маркеров ОС в десневой жидкости, тканях десен, слюне, плазме, сыворотке и клетках крови. Также отмечается изменение общего антиоксидантного статуса, активности супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионредуктазы, глутатионпероксидазы, миелопероксидазы, уровня витаминов С и Д, каротиноидов, мочевой кислоты, восстановленного глутатиона, мелатонина. Многочисленные свидетельства эффективности антиоксидантной терапии (полифенольных соединений, каротиноидов, флавоноидов, антоцианов, водо- и жирорастворимых витаминов и т. д.) в отношении пародонтита однозначно установили, что их использование должно быть частью терапевтического подхода в лечении.

Роль сахарозаменителей в диабетическом питании и персонализированном управлении заболеванием: Молекулярные и генетические механизмы

Мария Вячеславовна Будаева — 2025-03-25

В статье рассматривается персонализированный подход к замене сахарозы в питании пациентов с диабетом и предиабетом с учетом молекулярных и генетических механизмов, связанных с индивидуальной вариабельностью результата лечения и прогрессирования заболевания. В обзоре исследованы данные о том, как стратегии персонализированной медицины могут оптимизировать терапевтические результаты и улучшить уход за пациентами. Анализируя сахарозаменители, в частности новые композиции, такие как смесь аминокислот и полиолов, в контексте потенциального применения в профилактике сахарного диабета, в данной статье перечислены механизмы их действия на молекулярном уровне. Также рассмотрен вопрос, как генетические вариации отдельного пациента могут влиять на эффективность и безопасность употребления определенных сахарозаменителей. Описывая потенциал персонализированных подходов, основанных на молекулярных и генетических данных, мы показали возможность эффективного и индивидуализированного управления профилактикой и лечением диабета и других сопутствующих заболеваний, таких как возраст-ассоциированные заболевания, процессы старения, обусловленные гликированием RAGE-рецепторов.

Микробный метаболом кишечника: современные данные и перспективы практического применения

Наталья Витальевна Евдокимова — 2025-03-25

Исследования последнего десятилетия показали непосредственное участие кишечного микробиома и его метаболитов в регуляции жизненно важных процессов в организме человека. Обнаружено непосредственное воздействие микробного метаболома на центральный (конструктивный и энергетический) метаболизм человека, углеводный и липидный обмен. Наиболее изученными составляющими микробного метаболома являются короткоцепочечные жирные кислоты и продукты метаболизма ароматических аминокислот, синтез которых осуществляется как строгими анаэробами, так и факультативно-анаэробными обитателями кишечника человека. Показано, что кишечный микробный метаболом непосредственно вовлечен в синтез вторичных жирных кислот. Он также является участником нейроэндокринных взаимодействий. Полученные данные делают необходимым пересмотреть подходы к профилактике, а также схемы диагностики ряда патологий, в основе которых лежат метаболические нарушения. Ведется поиск микробных метаболитов, которые можно было бы использовать в качестве биомаркеров, позволяющих уточнять диагноз или стадии заболевания. Для этого предполагается разработка индивидуальных профилей клинически значимых микробных метаболитов человека. Результаты исследования метаболома открывают реальные перспективы для создания новых пероральных форм лекарственных препаратов, позволяющих минимизировать возможное вмешательство кишечной микрофлоры. Представляется весьма реальным создание синбиотиков, с учетом индивидуальных особенностей организма человека.

Клиническая эффективность полипептидного препарата Кортексин в терапии дисциркуляторных и посттравматических нарушений

Никита Вячеславович Макеев — 2025-03-25

Патологическая реструктуризация головного мозга является одним из наиболее угрожающих полноценному образу жизни человека фактором риска ввиду нарушения регуляции иных систем организма и прямого влияния на мыслительные, психосоматические и аналитические функции. Принимая во внимание особый риск поражения ЦНС как для биологической, так и для социальной жизнедеятельности пациента, многие отечественные и зарубежные специалисты ищут новые возможности усовершенствования как медикаментозной, так и хирургической коррекции церебральных нарушений. В обзоре приведены основные исследования, убедительно свидетельствующие об эффективности включения полипептидного препарата Кортексин в комплексную терапию посттравматических и дисциркуляторных расстройств с целью регенерации и улучшения перфузии мозговой ткани, восстановления когнитивных навыков пациентов. Проведен анализ наиболее актуальных работ по клиническому применению Кортексина, сформулирован вывод о составе доказательной базы для повсеместного использования пептидного препарата в различных сферах медицины.