Патологическая физиология и экспериментальная терапия https://pfiet.ru/ <p>Выходящий с 1957 года ежеквартальный журнал, посвящённый актуальным вопросам современной теоретической медицины.</p> Индивидуальный предприниматель Иришкин Дмитрий Андреевич ru-RU Патологическая физиология и экспериментальная терапия 0031-2991 Индуцированные глутаматом и ишемией изменения ионного гомеостаза в нейрональной культуре и коре головного мозга мышей, экспрессирующих Cа²⁺-сенсор GCaMP6f https://pfiet.ru/article/view/5261 <p align="justify"><strong>Актуальность.</strong> При исследованиях внутриклеточного сигналинга и межнейрональной передачи сигнала в мозге в норме и при патологии все большее применение находят трансгенные животные, экспрессирующие в нейронах флуоресцентный Са<sup>2+</sup>-сенсор. Вместе с тем, пока недостаточно исследовано, насколько изменения кальциевого гомеостаза в интактном мозге соотносятся с гораздо более подробно изученными изменениями этого важнейшего параметра в нейроглиальных культурах, служащих модельными системами живого мозга. <strong>Целью работы</strong> было на модели ишемического инсульта выяснить в какой степени изменения внутриклеточной концентрации Са<sup>2+</sup> ([Ca<sup>2+</sup>]) в мозге трансгенной мыши, измеренные с помощью флуоресцентного белкового сенсора GCaMP6f, соотносятся с изменениями [Ca<sup>2+</sup>] в первичных нейроглиальных культурах из кортекса этих животных. <strong>Методы.</strong> Методом широкопольной оптической нейровизуализации (ШОН) измерены изменения концентрации свободного Са<sup>2+</sup> в цитозоле нейронов ([Ca<sup>2+</sup>]<sub>c</sub>) головного мозга мышей. Измерения проводили перед и после фотоиндуцированного инсульта в сенсомоторной зоне коры. Изменения [Ca<sup>2+</sup>]c отслеживали по флуоресценции GCaMP6f, экспрессируемого в нейронах кортекса. На первичных нейроглиальных культурах из коры головного мозга мышей той же линии проверено влияние эксайтотоксических доз глутамата (Glu) на [Ca<sup>2+</sup>]c и на изменения средней концентрации свободного Са<sup>2+</sup> в цитои нуклеоплазме ([Ca<sup>2+</sup>]<sub>i</sub>). Измерения [Ca<sup>2+</sup>]i выполнены методом флуоресцентной микроскопии с использованием синтетических Са<sup>2+</sup>- индикаторов Fura-2 и Fura-FF. В культивируемых нейронах дополнительно к измерениям кальциевого гомеостаза выполнены измерения внутриклеточного рН (pH<sub>i</sub>), митохондриального потенциала (ΔΨm) и эндогенной флуоресценции NADH. <strong>Результаты.</strong> Фотоиндуцированная ишемия вызывает сильный рост [Ca<sup>2+</sup>]c в зоне облучения ~1,1 мм<sup>2</sup> (<em>n</em>=9). В течение суток область высокой [Ca<sup>2+</sup>]<sub>c</sub> расширяется до ~6 мм<sup>2</sup>, но к 7-м сут практически возвращается к размерам необратимого повреждения. В нейроглиальных культурах из коры головного мозга мышей этой же линии кинетика изменений [Ca<sup>2+</sup>]<sub>c</sub>, индуцированных Glu, напоминает кинетику [Ca<sup>2+</sup>]<sub>i</sub>, однако [Ca<sup>2+</sup>]c имеет значительно меньшую амплитуду при развитии отсроченной кальциевой дисрегуляции (ОКД). Сопоставление изменений [Ca<sup>2+</sup>] и pH<sub>i</sub> показывает, что различия могут быть обусловлены тушением флуоресценции GCaMP6f при закислении цитозоля в результате эксайтотоксического действия Glu. <strong>Заключение.</strong> Сопоставление сигналов экспрессируемого нейронами Са<sup>2+</sup>-сенсора GCaMP6f в мозге и синтетических Са<sup>2+</sup>-индикаторов в первичных нейроглиальных культурах, полученных из животных той же линии, показывает, что феномен ОКД, впервые обнаруженный в культурах, вероятно, реализуется и в нейронах целого мозга при инсульте. Вместе с тем, необходимо учитывать, что относительные изменения [Ca<sup>2+</sup>]c на разных стадиях развития ишемического повреждения и последующего восстановления мозга после фотоиндуцированного инсульта, могут быть искажены за счет влияния pH<sub>i</sub> на флуоресценцию белкового сенсора.</p> Евгения Николаевна Кислухина Наталья Владимировна Лизунова Оксана Юрьевна Лисина Ринат Рашидович Шарипов Ирина Александровна Красильникова Занда Валериевна Бакаева Всеволод Григорьевич Пинелис Александр Михайлович Сурин Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 5 20 10.25557/0031-2991.2023.01.5-20 Мутации гена митохондриального цитохрома В (MT-CYB) в сперматозоидах пациентов из бесплодных семейных пар https://pfiet.ru/article/view/5262 <p align="justify"><strong>Введение.</strong> Актуальной проблемой современной андрологии является выявление этиологических факторов мужского бесплодия. Одной из его причин являются мутации митохондриальной ДНК (мтДНК) сперматозоидов, приводящие к нарушению их энергообеспечения и подвижности. Митохондриальный геном подвержен частым мутациям и высокому полиморфизму в связи с особенностями его строения, расположения, а также из-за отсутствия рекомбинативной изменчивости, поскольку наследуется строго по материнской линии. Указанные особенности сопровождаются накоплением в сперматозоидах однонуклеотидных полиморфизмов в мтДНК (mtSNP). <strong>Цель исследования</strong> – выявление мутаций в гене митохондриального цитохрома В (<em>MT-CYB</em>) у бесплодных мужчин с астенотератозооспермией (89 пациентов) и олигоастенотератозооспермией (65 пациентов). <strong>Методика.</strong> Группа сравнения состояла из 164 фертильных мужчин. Для выделения тотальной геномной ДНК, включающей мтДНК, использовали мини-набор ДНК QIAamp Micro Kit. Определение и анализ генотипов полиморфных локусов в гене <em>MT-CYB</em> проводили методом дискриминации аллелей TaqMan. Для верификации мутаций в гене MT-CYB, фрагмент гена секвенировали методом Сэнгера на автоматическом ДНК-анализаторе Applied Biosystems Sanger Sequencing 3500 Genetic Analyzer. <strong>Результаты.</strong> В гене <em>MT-CYB</em> не выявлено однонуклеотидных полиморфизмов rs28357373 (замена тимина на цитозин в позиции 15629), следовательно, эта мутация не характерна для данной популяции пациентов и не влияет на развитие мужского бесплодия в регионе их проживания. Замена аденина на гуанин в позиции 15218, приводящая к миссенс-мутации p.Thr158Ala, также не проявила себя в качестве причины мужского бесплодия. Статистически значимые результаты были получены при анализе полиморфного варианта rs527236194 (замена триплета ССТ на ССС в позиции 15784). У пациентов с астенотератозооспермией указанная мутация встречалась значительно чаще (наиболее вероятно, что такой эффект обусловлен изменением экспрессии генов при смещении кодонов). <strong>Заключение.</strong> Таким образом, требуется проведение специального исследования по выявлению роли локуса rs527236194 гена <em>MT-CYB</em> в возникновении мужского бесплодия, а также возможности его использования в качестве биомаркера заболевания.</p> Камиль Шамилевич Галимов Юлия Юрьевна Громенко Ирина Ришатовна Гилязова Эльмира Фанисовна Галимова Ришат Яхъявич Сафиханов Саида Шамилевна Галимова Эмиль Марселевич Муратов Петр Францевич Литвицкий Валентин Николаевич Павлов Copyright (c) 2023-02-17 2023-02-17 67 1 21 27 10.25557/0031-2991.2023.01.21-27 Клинические, нейрофизиологические и лабораторные особенности дисфункциональных вегетативных расстройств у лиц молодого и среднего возраста https://pfiet.ru/article/view/5264 <p align="justify"><strong>Введение.</strong> Проблема дисфункциональных вегетативных расстройств (ДВР), этиология и патогенез которых во многом не ясен, имеет большое клиническое значение и привлекает к себе внимание как клиницистов-неврологов, так и патофизиологов работающих в области нейропатологии. <strong>Цель исследования</strong> – изучение клинических, нейрофизиологических и патогенетических особенностей ДВР у лиц молодого и среднего возраста. <strong>Методика.</strong> В исследование включено 46 пациентов в возрасте от 18 до 59 лет с ДВР и редкими паническими атаками. Контрольную группу составили 20 здоровых лиц. Анализировали клинические проявления тревоги и депрессии, выраженность вегетативных нарушений, оценивали степень когнитивных расстройств. Для оценки показателей вегетативной устойчивости пациентов использовали метод кожно-симпатических вызванных потенциалов (КСВП). На анализаторе Immulite 2000 (США) методом иммунохемилюминисценции определяли уровень инсулиноподобного фактора роста‑1 (ИФР‑1), активность тиреотропного гормона (ТТГ) и пролактина в венозной крови. <strong>Результаты.</strong> У всех пациентов с ДВР выявлены астенический синдром, нарушения сна и эмоциональная неустойчивость. Вегетативные нарушения у пациентов с ДВР были представлены повышенной потливостью, метеозависимостью, плохой переносимостью высоких и низких температур. По данным КСВП у пациентов с ДВР в 57,8% случаев выявлено преобладание симпатического компонента, в 31,1% – парасимпатического типа реакций, в 11,1% случаев отмечался смешанный тип вегетативных реакций. В возрастной группе 18‑35 лет отмечено усиление симпатического ответа, тогда как среди пациентов 36‑59 лет распространенность симпатического и парасимпатического компонентов была одинаковой (42,1%). У пациентов с ДВР отмечено повышение уровней ИФР‑1 и пролактина. <strong>Заключение.</strong> Проведенное исследование показало большую распространенность и вариабельность клинических симптомов у пациентов с ДВР. Полученные результаты подтверждают актуальность дальнейшего изучения ДВР у пациентов разных возрастных групп и с различными типами вегетативных реакций.</p> Марина Юрьевна Максимова Анна Сергеевна Галанина Copyright (c) 2023-02-17 2023-02-17 67 1 28 38 10.25557/0031-2991.2023.01.28-38 Эффективность курсового применения пальмитоилэтаноламида и трансплантации мезенхимальных стволовых клеток при экспериментальной периферической нейропатической боли https://pfiet.ru/article/view/5263 <p align="justify"><strong>Цель исследования</strong> – изучение влияния курсового внутрибрюшинного введения пальмитоилэтаноламида (РЕА, 1 мг/кг) в комбинации с однократным внутримышечным введением мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани (МСК ЖТ, 1х10<sup>6</sup> клеток/кг) на ноцицептивные реакции крыс и морфологию мягких тканей задней лапы крыс с периферической нейропатией (НП), вызванной перерезкой и иссечением участка седалищного нерва. <strong>Методика.</strong> Исследование выполнено на 28 крысах-самцах стока Wistar. В соответствии с дизайном исследования, осуществили моделирование: 1) НП без лечения; 2) НП с однократной трансплантацией МСК ЖТ; 3) НП с однократной локальной трансплантацией МСК ЖТ и курсовым приемом РЕА. Проведены измерения порога ноцицептивной реакции (ПНР) на механический стимул, латентного периода ноцицептивной реакции (ЛПНР) на термический стимул на протяжении 28 сут еженедельно и на 60-е сут. На 21-е сут после моделирования НП охарактеризована гистоструктура мягких тканей и сосудисто-нервного пучка задних лап крыс с периферической нейропатией на фоне трансплантации МСК ЖТ отдельно и в сочетании с курсовым приемом РЕА <strong>Результаты.</strong> Однократное введение МСК ЖТ приводило к увеличению ПНР и ЛПНР крыс с НП до исходных значений к 21-м сут после операции, подавляло воспаление периневральных тканей и способствовало неоваскуляризации сосудисто-нервного пучка в области аксотомии седалищного нерва. Курсовое внутрибрюшинное введение РЕА на фоне трансплантации МСК приводило к увеличению ПНР начиная с 1-й инъекции РЕА, но вместе с тем не приводило к восстановлению исходной ноцицептивной чувствительности на механический и термический стимулы на протяжении исследования, а также отменяло противовоспалительный эффект МСК ЖТ. <strong>Заключение.</strong> Курсовое применение РЕА при однократной трансплантации МСК ЖТ подавляло антиноцицептивное действие стволовых клеток, а также приводило к отмене их противовоспалительных эффектов в зоне иссечения седалищного нерва.</p> Анна-Мария Вадимовна Ерофеева Ольга Александровна Антипова Ирина Петровна Жаворонок Светлана Николаевна Рябцева Алла Юрьевна Молчанова Copyright (c) 2023-02-17 2023-02-17 67 1 39 47 10.25557/0031-2991.2023.01.39-47 Ингибирование опухолевого роста в клеточной культуре остеосаркомы с помощью микроРНК mir162a https://pfiet.ru/article/view/5265 <p align="justify"><strong>Цель исследования</strong> – изучение влияния микроРНК mir162a на жизнеспособность опухолевых клеток линии остеосаркомы SAOS-2. <strong>Методика.</strong> Исследования выполнены на клеточной линии SAOS-2. Была произведена трансфекция микроРНК mir162a в дозе 90 пмоль. Через 24, 48 и 72 ч после трансфекции методом флуоресцентной микроскопии производился подсчет жизнеспособных клеток, клеток в состоянии некроза и апоптоза, а также оценивался уровень аутофагии. <strong>Результаты.</strong> Трансфекция клеток SAOS-2 микроРНК mir162a через 24, 48, 72 ч приводила к снижению доли жизнеспособных клеток, увеличению доли клеток с признаками апоптоза и некроза по сравнению с контрольными образцами. Через 24 ч с момента трансфекции процент жизнеспособных клеток в опытных образцах был ниже чем в контрольных на 29,3%, через 48 ч – на 33,9%, через 72 ч – на 47,4%. Трансфекция SAOS-2 микроРНК mir162a приводила к четырехкратному снижению активности аутофагии. <strong>Заключение.</strong> Полученные результаты свидетельствуют о наличии у микроРНК mir162a терапевтического потенциала в качестве средства патогенетической терапии злокачественных опухолевых заболеваний.</p> Дмитрий Юрьевич Гребнев Ирина Юрьевна Маклакова Даниил Олегович Корнилов Вероника Михайловна Симарзина Михаил Андреевич Тряпицын Юрий Антонович Казанцев Данила Леонидович Зорников Юлия Витальевна Григорьева Федор Алексеевич Фадеев Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 48 55 10.25557/0031-2991.2023.01.48-55 Концентрация ко-ингибирующих иммунных контрольных точек и их лигандов в крови у пациентов с опухолью толстой кишки https://pfiet.ru/article/view/5266 <p align="justify"><strong>Введение.</strong> Опухолевые клетки способны модулировать иммунный ответ используя ко-ингибирующие иммунные контрольные точки, что позволяет им «ускользать» от иммунного надзора. <strong>Цель</strong> – определение уровня ко-ингибирующих иммунных контрольных точек (CTLA-4, TIM-3, LAG-3, PD-1) и их лигандов (B7-2, Galectin-9, PD-L1) в сыворотке крови у пациентов с опухолью толстой кишки. <strong>Методика.</strong> Под наблюдением находились 44 больных с колоректальным раком, 25 – с доброкачественной опухолью толстой кишки и 25 – контрольная группа (пациенты, которым выполняли пластику колостомы, сформированной ранее по поводу травмы толстой кишки). Уровень ко-ингибирующих иммунных контрольных точек (CTLA-4, PD-1, TIM-3, LAG-3) и их лигандов (B7-2, Galectin-9, PD-L1) определяли в крови методом проточной цитофлуометрии на анализаторе CytoFlex LX (Beckman Coulter, США), используя набор для мультиплексного анализа LEGENDplex™ HU (Immune Checkpoint, США). <strong>Результаты.</strong> Установлено, что у больных с раком толстой кишки в крови уровень ко-ингибирующих иммунных контрольных точек (TIM-3, CTLA-4, LAG-3) выше, чем в группе контроля. Уровень белка TIM-3 увеличивается в 11,7 раза (<em>p</em><0,001), CTLA-4 – в 2,77 раза (<em>p</em><0,001), LAG-3 – в 2,42 раза (<em>p</em>=0,02). Также у пациентов с колоректальным раком концентрация TIM-3 превышала аналогичный показатель больных с доброкачественной опухолью толстой кишки в 7,1 раза (<em>p</em><0,001), LAG-3 в 2,4 (<em>p</em>=0,01) раза. У больных со злокачественным новообразованием толстой кишки уровень лиганда TIM-3 (Galectin-9) превышал показатель группы контроля в 33,3 раза (<em>p</em><0,001), а лиганда CTLA-4 (B7-2) – в 2,51 раза (<em>p</em>=0,002). <strong>Заключение.</strong> Увеличение уровня CTLA-4, TIM-3, LAG-3 и их лигандов – B7-2 и Galectin-9 свидетельствует об участии данных ко-ингибирующих молекул в патогенезе колоректального рака. Установлена диагностическая значимость исследования уровня CTLA-4 и его лиганда B7-2 в выявлении онкологической патологии.</p> Андрей Валерьевич Четверяков Виктор Львович Цепелев Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 56 62 10.25557/0031-2991.2023.01.56-62 Влияние внутривенного введения провоспалительного цитокина ИЛ-1β на хеморецепторный контроль дыхания https://pfiet.ru/article/view/5267 <p align="justify"><strong>Введение.</strong> Интерлейкин-1бета (ИЛ-1β) играет ведущую роль в индуцировании цитокинового шторма, являясь ключевым цитокином управляющим развитием провоспалительной активности при повреждении легких. <strong>Цель исследования</strong> – изучение механизмов влияния ИЛ-1β на хеморецепторный контроль дыхания. <strong>Методика.</strong> Исследование проведено на 32 наркотизированных трахеостомированных спонтанно дышащих крысах. Регистрация параметров внешнего дыхания производилась пневмотахографическим методом. Для оценки вентиляционной реакции на гипоксию использовался метод возвратного дыхания. Для оценки влияния ИЛ-1β на хеморецепторный контроль дыхания производилось сравнительное исследование вентиляционного ответа на гипоксию при повышении содержания ИЛ-1β в циркуляторном русле и при сочетанном действии ИЛ-1β и диклофенака – ингибитора циклооксигеназной активности. <strong>Результаты.</strong> Показано, что внутривенное введение ИЛ-1β вызывает статистически значимое снижение вентиляционного ответа на гипоксическую стимуляцию, ослабляя тем самым компенсаторные возможности системы внешнего дыхания. Ингибирование циклооксигеназной активности устраняет влияние ИЛ-1β на гипоксический вентиляционный ответ. <strong>Заключение.</strong> Полученные данные позволяют предполагать, что активация циклооксигеназных путей может быть одним из основных механизмов влияния провоспалительных цитокинов на рефлекторный контроль дыхания.</p> Галина Анатольевна Данилова Вячеслав Георгиевич Александров Нина Павловна Александрова Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 63 70 10.25557/0031-2991.2023.01.63-70 Влияние гемотрансфузий у новорожденных и детей грудного возраста на состав и сродство к кислороду физиологического гемоглобина https://pfiet.ru/article/view/5268 <p align="justify">В клинической практике гемотрансфузий используется переливание эритроцитов крови от взрослых доноров реципиентам неонатального и младенческого периода развития с динамично изменяющимся уровнем фетального гемоглобина крови HbF (70-90%). Именно эта возрастная группа отличается уникальными физиологическими особенностями в быстро изменяющихся соотношениях гемоглобинов крови при росте и взрослении организма. Сохраняется ситуация неопределенности четких научных критериев изменчивости состава гемоглобинов крови у пациентов неонатального периода, способности динамично-меняющейся структуры гемоглобинов новорожденных к обеспечению тканей кислородом. <strong>Цель исследования</strong> – изучение влияния гемотрансфузий у новорожденных и детей грудного возраст на изменение состава и сродство к кислороду физиологического гемоглобина. <strong>Методика.</strong> Работа основана на результатах анализа клинических данных неонатологических отделений, отделений реанимации и интенсивной терапии. Систематизированы 923 исследования показателей типов гемоглобинов крови, кислотно-щелочного баланса и газового состава крови у 256 пациентов. Проведено сравнение динамики показателей структуры гемоглобинов крови и сродства к кислороду у новорожденных детей и младенцев до и после переливания эритроцитсодержащих компонентов донорской крови в процессе лечения. <strong>Результаты.</strong> При сравнении показателей фетального гемоглобина (HbF%) у новорожденных детей в зависимости от наличия или отсутствия гемотрансфузий показано, что снижение уровня фетального гемоглобина от общего гемоглобина крови, более выраженно у пациентов, получавших трансфузии эритроцитов крови. Более значителен был уровень снижения HbF% при переливаниях крови у недоношенных детей (до 29,81% по сравнению с 17,83% в группе доношенных). Определены уровни парциального давления кислорода в крови у новорожденных, при которых достигается 50 %-я сатурация (Р50 mmHg) – по этому параметру оценивается сродство гемоглобина к кислороду. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости достижения большей величины парциального давления кислорода (pO2) для 50% насыщения гемоглобина крови у новорожденных после проведения гемотрансфузий. <strong>Заключение.</strong> В отличие от старших возрастных групп накопление и выделение кислорода в ответ на потребности тканей у детей первого года жизни зависит не только от количественных показателей общего гемоглобина крови, но также от состава и соотношения типов. Снижение уровня фетального гемоглобина как физиологическое, так и при трансфузиях эритроцитов крови, сопровождается снижением сродства общего гемоглобина к кислороду у детей первого года жизни. Последнее обуславливает уменьшение способности к адресной доставке кислорода в участки тканей с наиболее выраженным ацидозом и гипоксией.</p> Иван Владимирович Гераськин Владимир Анатольевич Гераськин Наталья Валентиновна Гераськина Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 71 78 10.25557/0031-2991.2023.01.71-78 Прогностическое значение определения активности гаммаглутамилтранспептидазы в плазме крови крыс при действии электромагнитного излучения https://pfiet.ru/article/view/5269 <p align="justify"><strong>Цель исследования</strong> – оценка уровня активности γ-глутамилтранспептидазы в плазме крови крыс–при действии электромагнитного излучения дециметрового диапазона и проведение корреляционного анализа взаимосвязи активности этого фермента с основными показателями антиоксидантной защиты. <strong>Методика.</strong> Эксперимент выполнен на крысах, которые находились под действием электромагнитного излучения дециметрового диапазона в течение 3 мес. В динамике исследования через 1, 2 и 3 мес в плазме крови спектрофотометрически определяли активность фермента γ-глутамилтранспептидазы. Проведен корреляционный анализ взаимосвязи активности γ-глутамилтранспептидазы и содержания восстановленного глутатиона, а также активности этого фермента и содержания церулоплазмина в плазме крови. <strong>Результаты.</strong> Длительное пребывание животных в условиях воздействия электромагнитного излучения дециметрового диапазона приводит к увеличению активности γ-глутамилтранспептидазы в плазме крови наряду с увеличением уровня церулоплазмина и глутатиона. Установлены тесные корреляционные связи активности γ-глутамилтранспептидазы с содержанием восстановленного глутатиона в эритроцитах, а также активности этого фермента с содержанием церулоплазмина в плазме крови крыс. <strong>Заключение.</strong> Дана экспериментальная оценка влияния электромагнитного излучения на активность γ-глутамилтранспептидазы в плазме крови крыс. Фермент γ-глутамилтранспептидаза, наряду с антиоксидантами глутатионом и церулоплазмином, является мишенью для действия электромагнитного излучения. Электромагнитное излучение — один из возможных факторов формирования патологии сердечно-сосудистой системы.</p> Наталья Александровна Терехина Алексей Дмитриевич Селин Ольга Георгиевна Горячева Георгий Анатольевич Терехин Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 79 86 10.25557/0031-2991.2023.01.79-86 Разработка и изучение влияния дермального гидрогеля с экстрактом кукурузы столбиков с рыльцами на процесс репарации скарифицированных ран в эксперименте https://pfiet.ru/article/view/5270 <p align="justify"><strong>Введение.</strong> Одним из наиболее перспективных способов терапии раневых поражений является использование коллагеновых гидрогелей. Добавление растительных БАВ кукурузы столбиков с рыльцами (КСР) может значительно повысить антиоксидантное, кровоостанавливающее и противовоспалительное действие коллагеновых гидрогелей. Цель работы – оценка цитотоксических и репаративных свойств поликомпонентного дермального гидрогеля (ДГ) с экстрактом КСР. <strong>Методика.</strong> Густой экстракт КСР получали вакуумфильтрационным экстрагированием кукурузы столбиков с рыльцами. Для получения ДГ образцы свиной дермы подвергали децеллюляризации 5% NaOH. Для оценки цитотоксичности использовали дермальные фибробласты DF-1 с последующим анализом жизнеспособности методом Live&Dead. Исследование эффективности использования ДГ с 2% экстрактом КСР проводили на самцах крыс Вистар: группа 1-я – крысы без лечения (контрольная группа), 2-я – крысы с лечением ДГ с экстрактом КСР (опытная группа), 3-я – крысы с лечением ДГ без экстракта КСР (группа сравнения). Крысам в области холки наносили скарифицированные раны 30х20х2 мм, после чего раны крыс группы 2-й и 3-й обрабатывали ДГ в течение 7 сут. Препараты образцов кожи крыс обрабатывали антителами к CD68, CD3 или окрашивали гематоксилином и эозином. <strong>Результаты.</strong> ДГ и экстракт КСР в разведении 1:50 не проявляли токсических эффектов, поэтому данное разведение экстракта КСР было выбрано для получения комбинированного ДГ с 2% экстрактом КСР. По результатам визуальной, гистологической и иммуногистохимической оценки эффективности репарации в контрольной группе и группе сравнения на 7-е сут эксперимента в области раны отмечалось образование струпа, а в опытной группе на те же сроки формирование всех слоёв кожи. В опытной группе на 2-е сут в препаратах определялось значительное количество CD3 и CD68-позитивных клеток, а на 7-е сут данных клеток обнаружено не было. <strong>Заключение.</strong> Используемая для получения комбинированного ДГ концентрация экстракта КСР не токсична для клеток. При оценке результатов лечения исследуемым комбинированным ДГ отмечается положительный репарационный эффект как относительно контрольной группы, так и группы сравнения.</p> Карина Игоревна Мелконян Елена Борисовна Никифорова Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 87 93 10.25557/0031-2991.2023.01.87-93 Анализ причин и подходов к регуляции цитотоксического состояния микроглии стареющего мозга https://pfiet.ru/article/view/5274 <p align="justify">С момента эпохального открытия микроглии Пио дель Рио Ортегой минуло столетие многоплановых исследований, которые подтвердили гениально предсказанные испанским гистологом свойства и функции микроглиальных клеток. Однако причины возрастзависимого снижения гомеостатического/репаративного потенциала микроглии, также как подходы к модуляции цитотоксического состояния микроглии стареющего мозга остаются нерешенными вопросами на текущем этапе развития нейробиологии, в то время как возраст-ассоциированные нейровоспаление, нейродегенерация и нейродисфункция представляют собой угрожающий вызов современному «стареющему» социуму. <strong>Цель обзора</strong> – анализ представлений о причинах развития дистрофического/старческого фенотипа микроглии и подходов к увеличению ее нейрорепаративного потенциала в стареющем мозге. В работе обсуждаются прогрессирующая с возрастом глюкокортикоидная гиперпродукция и недостаточность про-разрешающих/про-анаболических факторов как ведущие механизмы в развитии возрастных дистрофических изменений микроглии.</p> Ольга Леонидовна Терехина Юлия Игоревна Кирова Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 94 109 10.25557/0031-2991.2023.01.94-109 Умеренные бактериофаги – тайное оружие бактерий или их ахиллесова пята? https://pfiet.ru/article/view/5275 <p align="justify">В последние десятилетия наблюдается возрождение активного интереса к фаговой терапии, связанный во многом с ограниченными возможностями антибиотикотерапии, а также с появлением данных о иммуномодулирующем действии фагов при их непосредственном взаимодействии с клетками иммунной системы человека. Изучение микробиома кишечника показало невероятное видовое богатство умеренных бактериофагов и их важную роль в регулировании численности и метаболической активности микробиомов человека. Особый интерес вызывает применение управляемой индукции (активации) профагов для лечения воспалительных заболеваний, вызванных бактериями. В настоящее время научная база для внедрения этого подхода в лечебную практику разработана слабо. Остаются опасения относительно неконтролируемого переноса генов патогенности и антибиотикорезистентности. Однако перспективы использования регуляторных возможностей умеренных бактериофагов для лечения хронических воспалительных заболеваний или дисбиотических нарушений в организме человека представляются реальными уже сейчас, особенно с учетом возможностей молекулярно-генетического модифицирования умеренных фагов.</p> Наталья Витальевна Евдокимова Татьяна Витальевна Черненькая Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 117 123 10.25557/0031-2991.2023.01.117-123 Внутриопухолевая гетерогенность менингиом в плоскости метиляционного профайлинга https://pfiet.ru/article/view/5276 <p align="justify"><strong>Введение.</strong> В последнее время все большую популярность приобретает выявление классов метилирования (МК) менингиом, позволяющее существенно повысить точность прогноза выживаемости пациентов. <strong>Цель работы</strong> – сравнительный анализ наиболее перспективных методов молекулярного исследования тканей. <strong>Методика.</strong> В данной работе сравнивали 2 перспективных диагностических подхода: выявление глобального профиля метилирования генома и выделение типов кластеров (ТК) клеток менингиом по их потенциальной диагностической значимости. Оценивали также фундаментальные факторы корреляции двух методов. Выделение ТК базируется на характеристике функциональных свойств клеток с помощью маркерных молекулярных факторов, демонстрирующих степень активации пролиферативных и метаболических процессов. С технической точки зрения подход включал в себя получение полноформатных изображений иммуногистохимических препаратов, их многоступенчатую медианную фильтрацию и особые режимы маскирования, а также дальнейшее создание многослойных комплексных изображений с максимально точным координатным сопоставлением. Все полученные результаты по активности экспрессии данных молекулярных факторов были использованы для проведения кластерного анализа с выделением клеточных кластеров в опухолях и дальнейшей вторичной кластеризации их в 8 ТК. <strong>Результаты.</strong> Показано, что в целом наблюдается однонаправленное прогрессирование свойств злокачественности опухоли и степени ее биологической агрессивности как при выявлении состава МК, так и содержания ТК. В то же время, по своей прогностической ценности подход с выявлением ТК в менингиомах превзошел подход с определением МК для новообразования. Наиболее действенной с прогностических позиций оказалась комбинация данных подходов. <strong>Заключение.</strong> Разработанный нами подход по функциональному профилированию клеток менингиом с разделением на ТК представляется чрезвычайно перспективным, способным раздвинуть диагностические границы. Дальнейшее развитие подобных комплексных подходов с включением других молекулярных методов позволит достичь принципиально нового качества диагностического процесса.</p> Павел Владимирович Никитин Гузель Раилевна Мусина Валерий Николаевич Полозов Владимир Михайлович Красновский Виктор Николаевич Николаев Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 124 132 10.25557/0031-2991.2023.01.124-132 Адаптация «Анатомического атласа «Пирогов» и «Aperio ImageScope» – программного обеспечения для интерактивной сенсорной панели в учебном процессе https://pfiet.ru/article/view/5280 <p align="justify"><strong>Цель</strong> – рассмотрение возможности и оценка практического значения использования программного обеспечения «Анатомический атлас «Пирогов» и «Aperio ImageScope» на интерактивной сенсорной панели в системе высшего медицинского образования для систематизации основополагающих медицинских сведений и современного анализа данных студентами в учебном процессе. <strong>Методика.</strong> При исследовании функционала программ применялась совокупность сравнительного анализа, описательного и библиографического методов, а также компьютерной 3D визуализации, которая позволила досконально изучить преимущества указанных учебно-информационных систем. Было отсканировано также 76 гистологических препаратов из архива кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии Омского государственного медицинского университета и 42 препарата предоставленные ФГБОУ ВО «ВМА им. С.М. Кирова». Сканирование проводилось с помощью специального микроскоп-сканирующего оборудования «Leica Aperio CS2». <strong>Результаты.</strong> «AperioImageScope» может использоваться как для групповых, так и для индивидуальных занятий, а также при самостоятельной работе обучающихся. Функция сравнительного анализа описания строения различных гистологических структур, масштабирование, возможность делать отметки и подписи на изучаемом изображении способствуют визуальному представлению и детальному изучению сложноорганизованных гистологических структур. Узкоспециализированное программное обеспечение «Анатомический атлас «Пирогов» обладает встроенной базой трёхмерных сцен для проведения цифрового препарирования, которое может также сопровождаться разворотом и детальным просмотром объекта в 3D пространстве наряду с послойным изучением анатомических систем и частей тела человека, долевого и внутриорганного макро- и микроскопического строения. Программа позволяет преподавателям самостоятельно моделировать тесты, соотнося вопросы с конкретными 3D-моделями, и подключать автоматизированную проверку выполненных заданий. <strong>Заключение.</strong> Предложенные программы, дают возможность использовать более широкий диапазон визуализации при изучении материала, который в свою очередь представляется более систематизированным, лучше усваивается и легче анализируется обучающимися, а также заметно повышает интерес к содержанию дисциплины, что улучшает профессиональную подготовку будущего специалиста.</p> Виктор Александрович Акулинин Дмитрий Борисович Авдеев Елена Дмитриевна Сергеева Светлана Алексеевна Барашкова Ирина Геннадьевна Цускман Анастасия Юрьевна Шоронова Copyright (c) 2023-03-17 2023-03-17 67 1 133 140 10.25557/0031-2991.2023.01.133-140