Изменения экспрессии IL-4 и IFN-γ в моноцитах и Т-лимфоцитах-хелперах при моделировании системного ювенильного идиопатического артрита у крыс Wistar
Аннотация
Цель исследования – изучение перепрограммирования мононуклеарных лейкоцитов на модели системного ювенильного идиопатического артрита (сЮИА), воспроизводимой у крыс Wistar с использованием полного адъюванта Фрейнда и липополисахарида. Методика. сЮИА воспроизведен у 6-месячных крыс-самцов Wistar. На 40-е сут эксперимента животные были разделены на 3 группы: 1-я группа контроль, 2-я группа «доксициклин», 3-я группа «дексаметазон». Взятие проб крови у животных проводили на нулевые, 41-е и 55-е сут. Мононуклеарные клетки периферической крови выделяли гравиметрически, после чего окрашивали их на маркеры и внутриклеточные цитокины. Дифференцировали моноциты (CD3-CD4+) и Т-хелперы (CD3+CD4+). Анализировали динамику внутриклеточной экспрессии интерлейкина IL-4 (рассматривали как маркер про-М2 фенотипа, т. к. в случае выделения из клетки ИЛ-4 служит стимулятором М2 поляризации макрофагов) и IFN-γ (как маркер про-М1 фенотипа) по данным проточной цитофлуориметрии. Применяли непараметрический статистический тест Mann-Whitney-Wilcoxon в программе R для статистической обработки данных. Результаты и заключение. При моделировании сЮИА выявлено закономерное изменение фенотипа моноцитов. Применение же доксициклина и дексаметазона приводило к более ранней поляризации их по про-М2-пути в отношении моноцитов (на 41-е сут) в сравнении с контролем. Про-М1 эффект (на 55-е сут, в сравнении с контролем) выявлен также в группах доксициклина и дексаметазона. У животных разных групп обнаружены характерные динамические изменения внутриклеточной экспрессии цитокинов. Важно, что различная направленность поляризации фенотипа при сЮИА и применении препаратов наблюдается не только у моноцитов, но и у Т-хелперов.
Скачивания
Литература
2. Литвицкий П.Ф., Сахаров В.Н., Алексеева Е.И., Маянский Н.А. Способ создания биологической модели системного ювенильного идиопатического артрита в эксперименте. Патент RU 2612843 C1. Заявка от 18.02.2016. Дата регистрации 13.03.2017.
3. Sikora K.A., Grom A.A. Update on the pathogenesis and treatment of systemic idiopathic arthritis. Curr Opin Pediatr. 2011; 23 (6): 640-646 URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22045308 (дата обращения: 01.10.2015)
4. Ombrello M.J., Remmers E.F., Tachmazidou I., Grom A., Foell D., Haas J.P., Martini A., Gattorno M., Özen S., Prahalad S., Zeft A.S., Bohnsack J.F., Mellins E.D., Ilowite N.T., Russo R., Len C., Hilario M.O., Oliveira S., Yeung R.S., Rosenberg A., Wedderburn L.R., Anton J., Schwarz T., Hinks A., Bilginer Y., Park J., Cobb J., Satorius C.L., Han B., Baskin E., Signa S., Duerr R.H., Achkar J.P., Kamboh M.I., Kaufman K.M., Kottyan L.C., Pinto D., Scherer S.W., Alarcón-Riquelme M.E., Docampo E., Estivill X., Gül A; British Society of Pediatric and Adolescent Rheumatology (BSPAR) Study Group; Childhood Arthritis Prospective Study (CAPS) Group; Randomized Placebo Phase Study of Rilonacept in sJIA (RAPPORT) Investigators; Sparks-Childhood Arthritis Response to Medication Study (CHARMS) Group; Biologically Based Outcome Predictors in JIA (BBOP) Group, de Bakker P.I., Raychaudhuri S., Langefeld C.D., Thompson S., Zeggini E., Thomson W., Kastner D.L., Woo P.; International Childhood Arthritis Genetics (INCHARGE) Consortium; British Society of Pediatric and Adolescent Rheumatology BSPAR Study Group. HLA-DRB1*11 and variants of the MHC class II locus are strong risk factors for systemic juvenile idiopathic arthritis. Proc Natl Acad Sci U S A. 2015;112(52):15970-5. URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26598658 (дата обращения: 23.02.2016)
5. Юшков Б.Г., Черешнев В.А. Понятие нормы в физиологии (физиологические константы лабораторных животных). М.: НП «ЦЕНТР СТРАТЕГИЧЕСКОГО ПАРТНЕРСТВА»; 2016. С189.
6. McWhorter F.Y., Wang T., Nguyen P., Liu W.F. Modulation of macrophage phenotype by cell shape. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013; 110 (43): 17253-8 URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24101477 (дата обращения: 01.10.2015)
7. Rat immunology. From Genes to Proteins to Cells. BD Biosciences (www.bdbiosciences.com)
8. R Core Team (2016). R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria. URL https://www.R-project.org/
9. Krzywinski M., Altman N. Points of significance: Visualizing samples with box plots. Nat Methods. 2014; 11(2):119-20 URL: http://www.nature.com/nmeth/journal/v11/n2/full/nmeth.2813.html (дата обращения: 26.05.2016)
10. Sakaguchi S., Yamaguchi T., Nomura T., Ono M. Regulatory T cells and immune tolerance. Cell. 2008;133(5):775-87 URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18510923 (дата обращения: 01.04.2014)
